Microscopia

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El Servicio de Microscopía del IPBLN ofrece un conjunto de prestaciones relacionadas con la observación y análisis microscópicos mediante Microscopía Óptica de altas prestaciones que incluye, Microscopía de célula viva, Microscopía de fluorescencia de campo ancho y Microscopía Confocal así como del software de tratamiento de imágenes necesario como Imaris y de Deconvolución indicado para cada tipo de Microscopía en tres dimensiones. El servicio está dotado de personal especialista cualificado, así como de los aparatos necesarios para que los usuarios sólo tengan que aportar el material que quieran observar.

En el caso de la Microscopía Confocal el personal del Servicio es el encargado de obtener las imágenes. De esta forma los investigadores sólo tienen que estudiar las muestras y seleccionar las imágenes que posteriormente podrán ser transformadas en fotografías procesadas en el mismo Servicio y almacenadas en soporte informático.

Además, el servicio realiza el mantenimiento y puesta a punto de los diferentes microscopios invertidos localizados en cuatro Laboratorios de Cultivos Generales, destinados a la observación de cultivos celulares, que disponen de varias cámaras digitales reflex de para fotografiar células en cultivo.

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Objetivos
Instalaciones

Sala 1.

  • Microscopio Zeiss Axio Imager A1. Microscopio invertido de fluorescencia y captación de imagen en monocromo en luz transmitida con distintos métodos de contraste.
  • Microscopio DM2000 Leica. Microscopio vertical de luz transmitida con distintos métodos de contraste. Dotado de software avanzado de adquisición.

Sala 2:

  • Microscopio Olympus con software Cell R para observación de célula viva, con cámara de incubación con temperatura y CO2 controlados.
  • Microscopio Confocal SP5 Leica  con cuatro láseres de 405 nm para UV, Argón con potencias de 458, 476, 488, 496 y 561 nm, laser HeNe de 543 nm y láser de HeNe de 633 nm. Dispone de licencia del programa LAS AF para la realización de diferentes técnicas de observación actuales como FRAP, FRET entre otros. Cabina con controlador de temperatura y CO2 y platina motorizada en XY para observación de célula viva y de larga duración.
  • Microscopio Confocal SP8 Leica dotado de láser blanco y diodo 405. Permite super-resolución método Lightning y nano-resolución mediante STED.

 

Además de asesoría en diseño de experimento, se ofrece servicio de Análisis de Imagen de los resultados.

Equipamiento

Microscopio confocal Leica tcs sp5

Microscopio de célula viva olympus IX81

Microscopio Leica DM2000 luz transmitida

Microscopio de campo claro Axiophot

Microscopio de campo claro Zeiss axioplan 2

Servicios Ofrecidos

1.- Cría y mantenimiento de cepas de ratones modificados genéticamente:
Diversas cepas (líneas) de ratón modificados genéticamente son producidas previa petición de los usuarios y para su uso en los proyectos de investigación, aprobados por el Comité Ético de Experimentación Animal. Se trata de cepas que por sus características genéticas especiales son difíciles de encontrar en las casas comerciales o que su valor hace inviable económicamente su adquisición continuada desde otros centros. Su cría se realiza en condiciones SPF (animales libres de patógenos especificados según el estándar de FELASA) con control sanitario periódico a través de un programa de centinelas.
La cría de estas colonias incluye la GESTION INTEGRAL DE LA COLONIA que garantiza la calidad sanitaria y genética de la línea:

  • Control reproductivo informatizado.
  • Programas de control sanitario.
  • Control genético: genotipado.

2.- Mantenimiento de otros animales de laboratorio:
Se mantienen roedores y conejos procedentes de otras Casas comerciales de Cría y Suministro de animales de experimentación, adquiridos directamente para su utilización en procedimientos experimentales.

3.- Producción de anticuerpos policlonales y colaboración con el Servicio de Cultivos en la producción de anticuerpos monoclonales:
Inmunización, extracción de fluidos biológicos  y otros órganos. Los procedimientos se realizan según los protocolos establecidos internacionalmente.

4.- Producción de fetos y neonatos de ratón a  fecha determinada:
Establecimiento de cruces, programas de sincronización de celos, superovulación, etc., control de tapones vaginales, y cesáreas programadas.

5.- Realización de técnicas experimentales en roedores y conejos:
Todos los procedimientos se llevan a cabo con nivel de bioseguridad II.

  • Administración de productos, inoculación de células y agentes infecciosos.
  • Obtención de muestras, extracción de sangre y otros fluidos.
  • Obtención de tejidos y órganos.

6.- Supervisión de los protocolos experimentales y realización de observaciones clínicas específicas.

  • Programa de aclimatización y aprendizaje para los animales.
  • Programa de enriquecimiento ambiental.

7.- Servicio de anestesia, analgesia y cuidados postoperatorios.

8.- Procedimientos quirúrgicos a medida.
Bajo la demanda de los usuarios, se desarrolla en la UEA protocolos quirúrgicos aprobados por el Comité Ético de Experimentación animal.

9.- Modelos animales precondicionados para estudios determinados.
Permite la obtención de modelos animales listos para ser usados:

  • Modelos para estudios de alimentación (obesidad, diabetes, hipertensión, etc).
  • Modelos de envejecimiento.
  • Modelos obtenidos por manipulaciones quirúrgicas bajo demanda: modelos de exéresis (castración, ovariotomía, adrenalectomía, tiroparatiroidectomía, nefrectomía, etc).

10.- Servicio de eutanasia y necropsias.

11.- Unidad para Estudios de dolor.

12.- Unidad para Estudios de comportamiento.

13.- Rederivación de líneas mediante hicterectomía aséptica.

14.- Servicio de Formación del  personal investigador:
Organización de Jornadas y Seminarios para la formación en el manejo y técnicas experimentales con roedores y conejos.

15.- Asesoramiento Técnico en Experimentación y Bienestar Animal.

Tarifas
Equipo CSIC (€/hora) Universidades y OPIs (€/hora) Otros centros privados (€/hora)
Microscopía de fluorescencia
Confocal sp5 13.23 34.69 37.99
Olympus ix81 5.39 18.50 20.27
Zeiss AXIO PLAN 2 IMAGER 4.96 9.66 10.58
Leica DMi8 NUEVO MICROSCOPIO CÉLULA VIVA 8.37 25.94 26.98
Leica DMi8 NUEVO MICROSCOPIO CÉLULA VIVA (Control de CO2 y temperatura) 11.33 32.33 33.62
Confocal sp8 Leica NUEVO – Modo confocal y Lightning 17.54 40.29 47.97
Confocal sp8 Leica NUEVO – Modo confocal y Lightning (in vivo) 20.76 43.86 50.12
Confocal sp8 Leica NUEVO – Modo STED 1 láser depleción 29.93 54.00 60.68
Confocal sp8 Leica NUEVO – Modo STED 2 láseres de depleción 37.20 63.03 73.84
Microscopía de luz transmitida
Microscopio DM2000 luz transmitida vertical (software de digitalización) 9.53 10.43
Asesoría y Análisis de Imagen Digital 41.81 45.79