Identificación y caracterización de secuencias reguladoras y funcionales contenidas en el elemento móvil L1Tc de Trypanosoma Cruzi.

Los elementos dispersos largos (LINE-1 o L1) son retrotransposones sin largas terminaciones terminales (LTR) presentes de manera abundante en los genomas de mamíferos que se movilizan, de forma autónoma, vía un RNA intermediario por un proceso que requiere de diversas actividades enzimáticas. Los elementos LINE parecen ser también los encargados de suministrar la maquinaria enzimática para la movilización de los SINE aunque se desconocen, en gran medida, las características enzimáticas y de funcionalidad de las proteínas que codifican. Interesantemente, el genoma de T. cruzi contiene un 30% de secuencias repetidas de tipo SINE y LINE, siendo estas esenciales para su biología.

En cuanto a elementos de DNA móviles nuestra investigación se centra en L1Tc, retrotransposon sin LTR de Trypanosoma cruzi.

La transcripción es el primer paso en la movilización de los LINEs y, por tanto, uno de nuestros objetivos es la caracterización y el análisis funcional de la secuencia promotora de L1Tc. También estamos interesados en conocer las propiedades enzimáticas y los requerimientos de la proteína bifuncional RT-RNasaH contenida en el elemento, así como identificar y caracterizar la secuencia en la que reside la actividad chaperona de ácidos nucleicos y de unión a los mismos presente en la proteína C2-L1Tc

Caracterización de proteínas recombinantes de Leishmania y Trypanosoma Cruzi como marcadores celulares de situación, progresión y control de Leishmaniosis en pacientes infectados con VIH y Leishmaniosis y enfermos chagásicos.

 Protozoos parásitos del género Leishmania son los agente etiológicos de un amplio espectro de enfermedades graves en el hombre conocidas como leishmaniosis. A pesar de que existe inmunidad adquirida frente a Leishmania, la tasa de infección se está incrementando especialmente en pacientes inmunodeprimidos. El tratamiento específico es ineficiente y tóxico y no existe ninguna vacuna frente a esta enfermedad.
El control de enfermedad requiere la inducción de una repuesta inmune múltiple frente a varios y específicos antígenos del parásito. Nuestra investigación en esta área se centra en identificar proteínas y antígenos cuyas propiedades las hacen ser consideradas como buenos candidatos para desarrollar inmunoterapias eficientes frente a la leishmaniosis. Para ello estamos produciendo moléculas quiméricas de DNA compuestas por secuencias que codifican varias proteínas de Leishmania infantum asociadas a la molécula inmunomoduladora T-HSP70. La capacidad de estas moléculas de producir una repuesta inmune eficiente frente a la infección se lleva a cabo en un modelo experimental murino donde se analiza, como parámetros de infección, los patrones histológicos y el nivel de parasitemia en tejidos diana como bazo e hígado. La capacidad antigénica (humoral y celular) de dichas proteínas recombinantes también se testan en infección natural, en sueros y sangre periférica de pacientes infectados con HIV y Leishmania.
Trypanosoma cruzi es un protozoo parásito y el agente etiológico de la enfermedad de Chagas la cual está considerada, en la actualidad, como uno de los problemas más serios de salud de America Latina. La capacidad de respuesta celular del hospedador ante el parásito resulta esencial en la evolución y severidad de la mencionada enfermedad. Así, la identificación de células T respondedoras a determinados antígenos del parásito resultará útil para el establecimiento de marcadores del estado de la enfermedad y de su evolución.
Nuestra investigación en esta área pretende identificar marcadores celulares que permitan establecer conexiones entre las respuestas especificas encontradas en diferentes grupos de pacientes chagásicos a estos marcadores y la severidad de la enfermedad y evolución post-tratamiento de la misma. Para ello hemos aislado y caracterizado varios genes que codifican antígenos específicos de T. cruzi y purificado las correspondientes proteínas recombinantes. Así, estamos interesados en establecer una serie de parámetros, relacionados con respuestas humorales y celulares específicas que sean indicativos del estado de la enfermedad en pacientes chagásicos y de su evolución.